MicroRNA实时定量PCR检测
客户提供
(1)新鲜的足量材料(细胞数107以上,组织100mg以上),或者提供保证质量的RNA样品(5μg以上);
(2)提供检测的miRNA信息。
服务内容
(1)RNA抽提;
(2)qRT-PCR检测客户所需的miRNA分子;
(3)递交详细的实验报告;
组织或RNA样品采集,保存与运输
一、哺乳动物培养细胞
收集并用冰冷的PBS洗涤细胞,将细胞沉淀(1×10 7个细胞)中加入1 ml的RISO TM裂解液。反复吸打几次后,细胞层溶解完全。- 70 oC保存或干冰运输。注:RISO TM处理的标本冷藏(4 oC)运输,短期(5天以内)亦可。
二、动物血液、组织样品采集、保存与运输
1、血液样本
客户需预先用淋巴细胞分离液分离新鲜血液中单个核细胞,然后采用培养细胞同样的处理方法保存及运输。
2、新鲜组织样品
取新鲜组织(注:处死后5min内取材,或新鲜组织离体时间不超过5min),组织块以冰冷的PBS或生理盐水清洗干净,并切为小块。
A、使用Biomics的RISO TM试剂
每50~100 mg组织加1 ml RISO TM溶液匀浆裂解组织样品,于冰上进行。匀浆的裂解液4 oC短期保存(1个月),-20 oC或-70 oC长期保存。干冰运输,短期(5天以内)冷藏(4 oC)运输亦可。
B、使用RNAlater试剂
将组织放入装有5倍体积RNAlater的冻存管中,4 oC孵育过夜,然后转入-20 oC中保存。RNAlater处理的标本可用常规冰袋4 oC低温运输(无需使用干冰-70 oC运输)。
3、冻存组织的保存与运输
A、立刻放入干冰或液氮中冷冻2-3小时后可转入-70 oC冰箱保存或保存在液氮中。
B、运输方法:冻存组织可放入干冰中直接运输,或者以RISO TM 4 oC下匀浆;冻存的组织块以液氮研磨后加RISO TM或直接加RISO TM以电动匀浆器匀浆,匀浆的裂解液干冰运输或短期(5天以内)冷藏(4 oC)运输。
【服务流程】
【威斯腾生物服务项目】
【本平台合作项目】
分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除/敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、siRNA与纳米载药、ChIP、Co-IP、生物信息学分析、知识产权服务!
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