方法：1) 10%水合氯醛2ml腹腔注射麻醉小鼠，浸泡在75%乙醇中。2) 在无菌条件下打开胸、腹腔，暴露心脏，依次剪去胸腹腔器官直至暴露主动脉，完整分离主动脉，放入35mm无菌平皿中，加入1 ml无菌PBS( pH 7.2) ，迅速转移至超净台。3) 用D-Hanks液反复冲洗，去除残留血液，用镊子小心剥离主动脉外的脂肪组织，小心剥去外膜，至血管光滑透明。5)将主动脉放入DMEM液(含4.5g/...

淋巴细胞主要来源：脾脏、外周血等外周血单个核细胞：淋巴细胞+单核细胞分离方法：密度梯度离心法，因为血液中各成分的比重存在差异，因此得以分离。第一层为血浆层；第二层为环状乳白色淋巴细胞层；第三层为透明分离液层；第四层为白细胞层；第五层红细胞。方法：（1）眼球取血，将血液滴入肝素抗凝管中，加入PBS按1：1稀释血液（一般采血管2mL+2mL）。（2）取淋巴细胞分离液2mL于15mL灭菌离心管中待用。（...

1.C57小鼠颈椎脱臼处死后浸泡于75%乙醇中消毒3~5 min后断头置于玻璃培养皿中，打开颅腔后取出全脑置于盛有冷D-Hanks'液的玻璃培养皿中解剖去除小脑、间脑(包括海马)。2. 随后将大脑半球在干滤纸上缓慢滚动以吸除软脑膜及脑膜大血管后置于新的含冷D-Hanks'液玻璃培养皿中，用细解剖镊去除大脑白质、残余大血管和软脑膜，保留大脑皮质。3. 用D-Han...

（1）取成牛眼球，75%酒精消毒，取出周围多余组织，用PBS洗3次，用PBS流水冲洗眼球3次。（2）沿角膜缘剪开眼球，弃掉角膜、晶体、玻璃体等部分，将眼球后半部翻转取出视网膜，将其剪碎平皿内加入适量0.25%的胰酶，在37℃培养箱中，采用分次消化，每次消化20min约8次。（3）每次消化后取上清液，并加入等量的含10%的DMEM培养基，轻轻混匀，中和胰酶的消化，防止消化过度。用200目细胞过滤筛子...

（1）麻醉及灌流：将大鼠以7%水合氯醛（0.5ml/100g）麻醉，75%乙醇消毒后移至工作台，0.45mm头皮针连接蠕动泵，打开蠕动泵，调整蠕动泵灌流速度为7ml/min，抽取37℃预热的灌流液I并排空装置内的空气。打开腹腔，将胃肠结构推向左腹上侧，分离出下腔静脉（肾上段）、肝门静脉，剪开隔膜，动脉夹夹闭下腔静脉肝上段，将头皮针插入下腔静脉（肾上段），动脉夹夹闭固定，打开蠕动泵，灌注37℃预热的...