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  • cDNA文库构建cDNA文库构建

    以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA...

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  •  全长cDNA文库构建 全长cDNA文库构建

    我们提供高全长比例的文库构建服务,全长比例可以高达85%以上。操作流程客户样品QC,Total RNA的提取;mRNA的分离;采用CAP Trapper法进行全长mRNA的富集;以mRNA为模板进行cDNA双链的合成;对合成的cDNA双链进行分级纯化;将分级纯化的cDNA与载体进行all-direct重组反应;将重组产物转化DH10B感受态细胞;cDNA文库的QC。检测文库库容量;每个文...

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  • 均一化cDNA文库构建均一化cDNA文库构建

    均一化cDNA文库是克服基因转录水平上巨大差异给文库的筛选和分析带来障碍的有效措施,有利于研究基因的表达和分析。现在,在构建均一化cDNA文库中至少有两种主要的观点。一种是基于复性动力学的原理,高丰度的cDNA在退火下复性速度快,而低丰度的cDNA复性要很长时间,从而可以通过控制复性时间来降低丰度;另一种是基于基因组DNA在拷贝数上具有相对均一化的性质,通过cDNA和DNA的饱和杂交而降低在文库中...

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  • 抑制性消减杂交cDNA文库技术抑制性消减杂交cDNA文库技术

    抑制性消减杂交文库技术是一种集抑制消减杂交、基因文库和斑点杂交等技术为一体的、突破性的差异表达基因高效筛选技术,与传统的DD-PCR、SAGE及cDNA-RDA等技术相比,具有低丰度mRNA富集效率高、假阳性低、灵敏度高、重复性好等特点。本服务方法结合了抑制性PCR和消减杂交技术,同时融入我公司自主创新研发的基因文库技术,经过体系不断优化,建立起了一套快捷、有效的差异基因全长cDNA筛选的方法。服...

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