大鼠坐骨神经慢性压迫致痛模型

疼痛是人们一生中经常遇到的不愉快感觉，它提供躯体受到威胁的警报信号，是生命不可缺少的一种特殊保护功能。另一方面它又是各种疾病最常见的症状，也是当今困扰人类健康最严重的问题之一。根据神经生理功能，疼痛可分为生理性疼痛和病理性疼痛，神经病理性疼痛是由神经系统损伤或异常的一种难以治疗的疼痛状态。坐骨神经慢性压迫损伤模型（chronic constriction injury of the sciatic nerve，CCI）是研究神经病理性疼痛最常见的动物模型。该模型操作简单，易掌握，术后第2天开始便出现疼痛反应，10～14天达到高峰，持续2个月后疼痛反应消失。

模型的制作

健康SD大鼠，6～8周龄，雄性，体重180～250g；

手术器械：4-0缝线、缝合针、弯镊2把、眼科剪1把、止血钳1把、5ml注射器、自制辅助固定钩2支、酒精棉球、棉签、电动剃毛器等；

操作步骤：

采用7%水合氯醛按0.5ml/100g的剂量腹腔注射麻醉动物，电动剃毛器剃去左后肢大腿外侧至股骨区域的毛发。

将动物以俯卧位固定四肢于手术板上，酒精棉球对手术区皮肤进行消毒处理后切开左侧大腿皮肤约1.5cm。

止血钳顺肌纹钝性分离股二头肌即可暴露出坐骨神经。固定钩稍微撑开肌肉，暴露出手术视野，用镊子轻柔分离出坐骨神经，在坐骨神经三叉分支前的主干部位游离神经7mm左右。

在距离三叉分支前2mm处，用4—0缝合线结扎坐骨神经4道，每道间距1mm，使被结扎的神经长约4～5mm。结扎的松紧程度以打结时可见小腿肌肉或脚趾轻微抽动为准。

手术区用生理盐水或PBS冲洗干净，依次缝合肌肉、皮下组织及皮肤，清洗伤口并用酒精消毒。

CCI动物模型的验证

行为学观察：在术后两周内，每隔1～2天观察大鼠的步态和左后肢的姿势、局部皮肤以及肌肉张力的改变程度、是否存在舔咬肢体现象等。较成功的模型术后1～2周内，下肢行走无力，左侧足趾并拢轻度外翻，经常悬空不敢着地；站立时以右后肢持重，左后肢抬起并紧贴腹部；术后14d左右，左后肢出现比较明显的肌肉萎缩。

WB检测GCH1表达程度：分别于手术3、7、14、28天，取大鼠手术侧L4～L6背根神经节（DRG），Western Blotting检测与疼痛相关基因三磷酸环化水解酶1（GCH1）的表达变化。与正常大鼠相比，CCI大鼠GCH1的表达水平明显更高，且呈现先升高后降低的趋势。

【服务流程】

【本平台可构建的动物模型（部分）】

【本平台合作项目】

分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除/敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、siRNA与纳米载药、ChIP、Co-IP、生物信息学分析、知识产权服务！

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