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Affymetrix SNP芯片

人类基因组由30亿个核苷酸组成,它们携带着人类的遗传信息并决定人体的生理特征。人类基因组序列的0.1%—0.2%在人种、人群和个体之间存在DNA序列的差异,即单核苷酸多态性(SNP,single nucleotide polymorphism)。许多的这些单核苷酸多态性可引起不同的遗传性状,即遗传的多态性(polymorphism),如ABO血型位点标记,白细胞HLA位点标记和个体药物代谢差异等。了解这些DNA序列的差异和单核苷酸多态性以及这些差异所表现的意义将给疾病的预测、诊断、预后和预防带来革命性的变化。威斯腾生物公司为客户提供稳定而优质的Affymetrix SNP分析检测服务,为客户提供芯片杂交、洗涤、扫描和数据分析等服务。同时,我们还利用SBC与南方基因中心的合资子公司南方基因科技有限公司引进的Illumina微珠基因分型分析系统为广大科研工作者提供SNP芯片技术服务。


Affymetrix SNP芯片服务 

Affymetrix Genome-Wide Human SNP Array 6.0(推荐) 

芯片介绍:Affymetrix Genome-Wide Human SNP 6.0芯片产品的涵盖超过1,800,000个遗传变异标志物:包括超过906,600个SNP和超过946,000个用于检测拷贝数变化(CNV,Copy Number Variation)的探针:

1)482,000个SNPs来自于前代产品500K和SNP5.0芯片;

2)424,000个SNP包括了源来于国际HapMap计划中的标签SNPs,X,Y染色体和线粒体上更具代表性的SNPs,以及来自于重组热点区域和500K芯片设计完成后新加入dbSNP数据库的SNP;

3)202,000个用于检测5,677个已知拷贝数变异区域的探针,这些区域来源于多伦多基因组变异体数据库。该数据库中的每个3,182个非重叠片断区域分别平均用61个探针来检测;

4)744,000个探针平均分配到整个基因组上,用来发现未知的拷贝数变异区域。

具体应用:除了SNP基因分型之外,还能进行CNV研究。从而能够进行Copy-neutral LOH/UPD检测,亲子鉴定,纯合性分析、血缘关系鉴定。

 
Affymetrix Mouse Diversity Genotyping Array 

芯片介绍:这款芯片与Human SNP 6.0 芯片类似,既包含SNP探针,也包含CNV探针。一共涵盖623,124个SNP位点和916,269个CNV探针。

Affymetrix GeneChip Rice 44K SNP Genotyping Array

芯片介绍:

芯片覆indica,aus,tropical japonica,temperate japonica and group V (“aromatic”)多个水稻亚种的44,1000个SNP。

芯片特点: 
1.全基因组覆盖:每10kb至少包括1个SNP,每个SNP设计12个探针技术重复相关系数R2>99%。
2.简便的样本:叶组织或抽提的DNA便可快速灵活的对遗传种质进行鉴定和分类。
3.从实验样本DNA到数据快速转换。


其它物种商品化SNP芯片包括:牛(bovine和buffalo)、鸡、水稻、生菜、胡椒、拟南芥、狗和小鼠。如有其它物种定制需求,请咨询各地办事处。 

服务相关(以Affymetrix SNP6.0芯片为例) 

样品要求 
1. 样品纯度:OD 260/280值应在1.7~2.0 之间;RNA 应该去除干净;不得有其它个体或其它物种的DNA污染。
2. 样品浓度:浓度不低于55ng/µl。
3. 样品总量:每个样品总量不少于1µg。
4.样品溶剂:溶解在Reduced TE (10mM Tris, pH 8,0,0.1mM EDTA)中。
5. 样品运输: DNA低温运输(-20℃);在运输过程中请用parafilm将管口密封好,以防出现污染。


服务内容 
1. DNA抽提; 
2. 样品质检:用琼脂糖凝胶电泳或LAB-ON-CHIP系统对样品DNA进行质量检测和定量; 
3. 实验过程:a、扩增,标记; b、杂交、洗脱(具体见左图); 
4. 图像扫描:用Affymetrix Scanner3000 7G激光共聚焦扫描仪对杂交结束后的芯片进行扫描; 
5. 数据处理:确定检出的SNP位点相应的核苷酸。


数据分析流程 
1. SNP位点过滤
1)Nocall rate>=10%
2)最小等位基因频率,Minor allele frequency<0.05
3)不符合哈维平衡的位点,HWE P value<0.001 的位点
2. 频数统计:计算case/control 组中各等位基因和基因型的频率
3. 关联分析
1)样品群的分层分析
2)卡方检验、Fisher精确检验,比较各allele的频率分布在case和control两组中是否具有统计学差异
3)卡方检验、Fisher精确检验和Cochran-Armitage趋势检验,比较各基因型频率分布在两组中是否具有统计学差异
4. 单倍型分析
1)选取包含显著的SNP的区段进行单倍型分析,以进一步定位候选区段
2)频率较高的几种单倍型各自的频率,在case/control两组中的分布状况,卡方统计量及p值,判断单倍型与疾病相关性


结果报告 
1、实验数据:原始数据(cel文件),基因芯片数据总表,SNP位点信息。
2、实验文件:SNP芯片实验操作方法。
3、实验图像:SNP芯片扫描图(jgp格式),所有样品的质检电泳图。
4、质检文件:DNA质检报告,SNP Call rate。

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【服务流程】

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【威斯腾生物服务项目】

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【本平台合作项目】

分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除/敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、siRNA与纳米载药、ChIP、Co-IP、生物信息学分析、知识产权服务!

 

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