过表达慢病毒

目前很多课题研究都会使用到慢病毒载体，通过针对目的基因构建过表达慢病毒，转染到目的细胞或者动物体内，研究其目的基因上调对细胞或者动物某种通路或者疾病的影响。

一、实验操作步骤：

1. 根据目的基因相关信息（注：客户提供基因ID或者基因序列）获取目的基因； 
2. 选择符合实验要求的载体； 
3. 将目的基因构建到慢病毒载体获得含有目的基因的重组载体； 
4. 对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量（不含内毒素）的重组质粒； 
5. 使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染293T 细胞，进行病毒包装并收集上清液； 
6. 通过超滤和超速离心浓缩和纯化病毒； 
7. 使用病毒液感染293T细胞，测定病毒滴度。

二、客户须知

1. 提供与本实验相关的详细资料；

2. 提供目的基因RefSeq ID；

3. 目的基因的表达克隆及相关信息；

4. 目的基因抗体及抗体使用说明书（如委托本中心的实验中涉及Western Blot实验）；

5. 目的细胞及相关说明（如委托本中心的实验中涉及目的细胞的培养）。

三、结果提供

1. 目的基因慢病毒质粒测序文件,测序图谱,质粒结构图,序列比对文件；

2. 目的基因慢病毒质粒构建、包装、纯化实验报告；

3. 1ml过表达病毒，并赠送阴性对照（病毒滴度 ≥1 X 108 TU/ml），同时提供病毒滴度检测报告；

4. 功能检测的相关实验报告。

注：报告未能详尽的实验相关数据，本中心在能力范围内予以补充。

四、慢病毒、腺病毒、逆转录病毒载体系统的比较

【服务流程】

【威斯腾生物服务项目】

【本平台合作项目】

分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除/敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、siRNA与纳米载药、ChIP、Co-IP、生物信息学分析、知识产权服务！

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