免疫荧光检测

将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记，试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后，测定复合物中的荧光素，这种免疫技术，称为免疫荧光素技术。

常见荧光素：  

（1） FITC
（2） RB200
（3）TRITC
（4）镧系：Eu、Tb
（5） PE
（6）其它

 实验步骤： 

1. 4 µ m石蜡切，60℃烤，30min。

2. 常规脱蜡至水（二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各10min，无水乙醇，95％乙醇，85％乙醇，75％乙醇各2min）。

3. PBS洗（磷酸盐缓冲液0.01mol/L pH7.4）3×3min。

4. 0.1%胰蛋白酶（100ml蒸馏水中加入100mg胰蛋白酶，100mg氯化钙，用0.1N NaoH调pH至7.6），37℃，消化30min。

5. 0.01mol/L pH7.4 PBS洗3×3min。

6. 兔抗人AFP1:50（用专用抗体稀释液稀释）37℃，1h或室温4h，或4℃过夜。

7. PBS洗3×3min。

8. 羊抗兔IgG-F，1:20稀释，37℃，1h，室温2h。

9. PBS洗3×3min。

10.蒸馏水洗3min。

11.pH9.0缓冲甘油封片。

12.镜检，阳性呈明亮绿色荧光。

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【威斯腾生物服务项目】

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