牛视网膜血管内皮细胞原代培养

（1）取成牛眼球，75%酒精消毒，取出周围多余组织，用PBS洗3次，用PBS流水冲洗眼球3次。

（2）沿角膜缘剪开眼球，弃掉角膜、晶体、玻璃体等部分，将眼球后半部翻转取出视网膜，将其剪碎平皿内加入适量0.25%的胰酶，在37℃培养箱中，采用分次消化，每次消化20min约8次。

（3）每次消化后取上清液，并加入等量的含10%的DMEM培养基，轻轻混匀，中和胰酶的消化，防止消化过度。用200目细胞过滤筛子过滤含细胞的混合液，最后将过滤后的细胞悬液1000rpm离心5min。离心后收集沉淀，用PBS再次重复离心3次。用细胞培养基将细胞沉淀重悬，接种于细胞培养瓶中培养，并每日观察细胞的生长，接种后约4d后有少量细胞贴壁。

【服务流程】

【威斯腾生物服务项目】

【本平台合作项目】

分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除/敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、siRNA与纳米载药、ChIP、Co-IP、生物信息学分析、知识产权服务！

【全国免费热线】400-675-6758

【电话】 023-65227525

【邮箱】 china-western@163.com

【官网网址】www.cqwestern.net；www.cqwestern.com

【地址】 重庆市高新区二郎创业大道高科创业园D栋2楼