大鼠大脑皮质神经元的原代培养

方法：

1、新生1天内的SD大鼠，断头，剪开头皮及颅骨，取出脑组织，置于盛冷的D-Hank's液的平皿中（下置冰袋）。

2、无菌剥离脑组织,分离大脑皮层，仔细剥离脑膜及血管。

3、将组织剪切成 1mm³左右的组织块，0.125%胰蛋白酶消化，37℃作用 15-20min，制成细胞悬液。

4、悬液收集于新的离心管，弃上清液重悬，过滤。台盼蓝计数。接种到预先用多聚赖氨酸包被的24孔培养板。

5、培养 4～6h，全量更换为2%B27 Neurbasal培养液。体外培养第3d，加入Ara-C-工作液，以抑制非神经细胞过度增殖，作用 24 h后吸出。此后每 3d半量换液1次 , 体外培养第 7～21天的细胞用于实验。

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