6-OHDA损毁建立部分损伤PD模型

1．低剂量6-OHDA内侧前脑束或黑质注射

（1）操作步骤
        Fisher大鼠，雄性，体重275g左右。腹腔注射水合氯醛麻醉后，按上述方法固定于脑立体定位仪上，切开皮肤，暴露前、后囟以确定注射部位。损毁内侧前脑束（MFB）者定位于前囟后4.0mm，中线旁开1.8mm，颅骨外表面下8.5mm：损毁黑质吻侧部者定位于前囟后5.0mm，中线旁开2.0mm，颅骨外表面下7.5mm。注射6-OHDA剂量4ug，注射时间为1分钟，留针5分钟，然后慢慢退针（约2分钟）。缝合皮肤后，将大鼠放口笼中。
（2）模型检测
        行为学检测：术后第三周，将大鼠腹腔内注射AMPH（5mg/kg），诱发大鼠向损伤侧旋转。于第四周，再次腹腔内注射APO（0.05mg/kg），诱发大鼠向健侧旋转。用自动旋转测试仪计数每次药物注入后90分钟内大鼠旋转次数。将AMPH诱发旋转大于200圈/小时，且APO诱发旋转小于60圈/小时者，定为部分损伤大鼠模型。

2．6-OHDA纹状体内注射
（1）操作步骤
        SD大鼠，雌性，体重225g左右，按上述方法麻醉，固定，暴露前囟。注射部位于左、右侧纹状体均可。定位参数以前囟和颅骨中线为参照。注射部位在前囟前1.0mm，中线旁开3.0mm，硬脑膜下4.5mm：注入6-OHDA剂量为20ug（溶解于3ul 0.9％的生理盐水中并加入0.2mg/ml的抗坏血酸）。注射时间约3分钟，留针3分钟后慢慢退出。
（2）模型的检测
         旋转行为检测：术后一周，将大鼠腹腔内注射AMPH（5mg/kg）诱发大鼠旋转。计数90分钟内的旋转次数。于第三周，皮下注射APO（0.25mg/kg），诱发大鼠向健侧旋转。计数40分钟内大鼠旋转次数。AMPH诱发旋转在3圈/分钟者，可作为部分损伤PD模型。
        迈步试验：选择一个1.1米长，倾斜放置的木板，木板的一端连通鼠笼。试验开始前3天，先让鼠对试验环境有所适应，并设法训练大鼠慢慢爬回到笼中。试验开始后，实验者一只手固定大鼠双后肢并轻轻上提，使其离开桌面，另一只手固定一侧前肢，让未固定的一侧前肢接触桌面。待该前肢自动移动时，开始计时。记录从开始迈步到回到鼠笼所需要的总时间。同时记录走过整个斜面的步数。然后，用斜面的长度除以步数即为步长。检测顺序为先左侧后右侧，并重复2次。
        步态调整试验：研究人员用上述相同的方法固定大鼠后，向侧前方慢慢移动大鼠，使其在5秒钟内走完90 cm距离，记录大鼠所用的步数。然后再向侧后方移动大鼠，记录步数。检测顺序为先右侧后左侧。每天重复2次。正常大鼠对这种被动运动的反应是被检前爪出现一系列的调整步态，6-OHDA损伤大鼠健侧前爪这种步态调整的次数明显减少，而损伤一侧前爪往往不受影响。
        熟练运用前肢的试验。在一有机玻璃制成的方盒内，放置一个有7层台阶的斜梯，在斜梯的第2-5层台阶的两侧各放10粒大鼠饲料颗粒，每粒45mg重。动物禁食2天后置于试验盒中，使其熟悉试验环境并爬梯取食。然后连续测试7天。分别记录每次测试中大鼠抓取和吃掉的饲料颗粒数。（Deniz Kirik等，1998）

【服务流程】

【本平台可构建的动物模型（部分）】

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