Cas9基因敲入细胞系

稳定细胞系在重组蛋白制备、抗体制备、药物筛选、基因功能研究及其它方面起着重要作用。稳定细胞系能持续生长，并持续稳定表达外来基因。根据研究或应用方向，可通过改变插入的拷贝数及启动子活性，调控外源基因在靶细胞的表达水平，使其升高、降低、或与靶细胞内源基因表达量相等。外源基因的插入方式可分为随机插入，或插入定点位置。

威斯腾生物现为广大研究者提供稳定细胞系构建服务，使用最先进技术水平，为您提供高质量的稳定细胞系。构建服务可使用复能基因提供的 CHO、HEK293、Hela、NIH3T3等工具细胞，也可使用客户指定的特定细胞系。从克隆构建、细胞系建立、基因扩增、单克隆筛选、细胞系鉴定、到功能研究，全方位的实验选择可满足研究者对蛋白表达、基因沉默等多种科研需求。

选择威斯腾生物哺乳动物稳定细胞系构建服务，您可以： 

1）自由选择基因插入方式；

2）自由选择克隆载体；

3）自由选择靶细胞系；

4）自由选择扩增基因或调整蛋白表达量；

基因敲入技术一直是研究特定基因功能的有效工具。威斯腾生物利用最新的CRISPR/Cas系统可以有效的实现对细胞系特定基因的敲入。

我们利用该技术，定点敲入各种细胞系中的特定基因。对打靶细胞进行药物筛选，利用CRISPR/Cas系统获得的基因敲入细胞的剔除效率会明显高于常规的利用RNAi和shRNA介导的基因敲落。

技术特色

1、可实现多个靶基因位点及多个基因的同时敲入；

2、最新Nickase酶/双gRNA技术，显著降低脱靶率；

3、无种属限制，适用于各种细胞系的靶向敲入。

操作流程

靶向目标序列sgRNA的设计及载体构建；

目标细胞系共转染；

阳性细胞株的筛选和鉴定。

参考细胞系

肿瘤细胞系： BEL-7402人肝癌细胞  CNE人鼻咽癌细胞  Hela人宫颈癌细胞  MCF-7人乳腺癌细胞等

神经细胞系：SK-N-SH人神经母瘤细胞

卵巢细胞系：SK-OV-3人卵巢癌细胞

血管平滑肌细胞系：VSMC血管平滑肌

成纤维细胞系：包皮成纤维细胞，心肌成纤维细胞

肺细胞系：SK-MES-1人肺鳞癌细胞  NCI-H460人大细胞肺癌细胞 A549人非小细胞肺癌细胞

肾细胞系：NRK肾小球足细胞

巨噬细胞：MH-S小鼠肺泡巨噬细胞 RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞  THP-1人单核巨噬细胞

内皮细胞：HUVEC人脐静脉内皮细胞

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具体CRISPR /Cas9细胞建系技术定制服务，欢迎联系我们。

【服务流程】

【威斯腾生物服务项目】

【本平台合作项目】

分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除/敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、siRNA与纳米载药、ChIP、Co-IP、生物信息学分析、知识产权服务！

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